[讨论] 母种细菌污染的原因

ccaxw

细菌发生与有没有冷凝水无关，有冷凝水出现细菌污染容易辨认，但接种不规范、菌种带菌才是出现问题的关键。

田鸿

QUOTE:

以下是引用jph6060在2010-3-7 22:41:10的发言：
如果是同一批试管, 在规范的接种动作和无污染种源(排除外源污染)的情况下.  有冷凝水的试管出现细菌污染,  而没有冷凝水的试管没有出现细菌污染,  那么是不是就此可以判定,  没有被细菌污染的试管,  百分之百可能存在隐性污染.

什么是细菌的隐形污染？

jph6060

如果是同一批试管, 在规范的接种动作和无污染种源(排除外源污染)的情况下.  有冷凝水的试管出现细菌污染,  而没有冷凝水的试管没有出现细菌污染,  那么是不是就此可以判定,  没有被细菌污染的试管,  百分之百可能存在隐性污染.

myb

 

王老师的帖子立题很好，首先要明白母种培养基斜面上，为什么会有冷凝水时，我认为这些冷凝水主要是由于灭菌后试管内外的温差导致，高压灭菌一般我们要求的温度是115度以上，而出锅摆斜面时室内温度是多少？必然有较大的温差，导致试管内的蒸汽迅速冷凝于试管内壁，而成为冷凝水，冷凝水流之棉塞和操作不严必然导致细菌污染，这跟灭菌没有关系。

还有关于细菌隐性污染的问题，何谓隐性污染？简单的解释就是感染细菌、酵母菌等则不能用肉眼直接观察发现，而只能通过显微镜或移接斜面培养基培养后才能检出，才能称之为隐性污染。细菌污染时，由于它们没有菌丝，是单个细胞分裂繁殖，因此，污染严重时，在试管中可发现其菌落隆起，表面光滑，不透明，似蜡烛油状。转接母种中的细菌菌量不多时，食用菌菌丝和细菌能同时生长；因细菌很小，杆菌和螺旋菌只有0.1一0.2微米，而食用菌的菌丝较粗，当细菌在竞争中不能形成菌落时，不易被肉眼发现，从而会造成母种的隐性污染。

田鸿

能在食用菌母种培养基上生长的细菌都是可培养细菌，容易生长，而且菌落大，不管斜面上有没有冷凝水都要形成菌落，不是因为没有冷凝水就不生长，只是有冷凝水细菌扩散面大，容易看到。再有，如果斜面上真有细菌，接种后细菌生长速度远比食用菌菌丝生长速度快，很快把营养消耗掉，甚至产生毒素，食用菌菌丝没有营养或被毒害，菌丝长势稀稀拉拉，不可能掩盖细菌菌落，也就不可能出现这种形式的隐形污染。只有一种是可能的，就是接种菌块的菌丝上有不可培养细菌才会有“隐形污染”。

南湖春

我想：隐形污染可能就是在无冷凝水的PDA上不表现出细菌污染，而由于细菌的好水性，在有冷凝水时，细菌大量繁殖表现出污染。食用菌生产中还有几个想不通的问题，提出来大家发表一下高见：
      1.水袋产生。肯定是进水了，但为啥有的进水，有的不进水。
      2.麦粒结块。每次灭菌都有部分麦粒结块，为何？

jph6060

我有过这种经历,  有水(冷凝水)试管, 接种时容易污染细菌. 而无水(阴干)试管, 不容易污染细菌. 有水试管接种成品率(不污染)30%-70%, 而无水试管接种成品率几乎为100%. 

田鸿

斜面有冷凝水与细菌污染无关。斜面细菌污染多是接种操作不正确、自制棉塞没有固型以及接种后平放试管棉塞被打湿造成。试想一下，既然试管是严格灭菌的，那细菌细胞是从何而来？？

田鸿

我做母种是第一天做斜面第二天接种，从未出现过污染，即使邮递回来的菌种试管破了都接活而没有污染，这就是接种操作问题，与冷凝水无关，倒是学生不熟练，常有少量污染。

jph6060

QUOTE:

以下是引用lhdxzx在2010-3-12 11:17:39的发言：
有冷凝水的试管出现细菌污染,  而没有冷凝水的试管没有出现细菌污染,  其主要原因是灭菌后处理不当所致，冷却速度快导致空气快速进入带入了有害菌。

不支持.