[讨论] 母种细菌污染的原因

本蕈

既然棉花塞带细菌，我想应该更可能带霉菌。因为空气中本来就大量存在霉菌孢子。这个帖子好，但是所有的理由还是无法让人感到折服。

本蕈

冷凝水不是细菌的污染源这句话有理。我赞同。我用过相对较大量的福尔马林和高锰酸钾在接菌箱里操作，有冷凝水的培养基细菌易感染，也不是全军覆没，但是相比量要大的多。

那么果真是菌种与操作不当吗？

heimuer

QUOTE:

以下是引用jph6060在2010-3-7 13:06:49的发言：
我有过这种经历,  有水(冷凝水)试管, 接种时容易污染细菌. 而无水(阴干)试管, 不容易污染细菌. 有水试管接种成品率(不污染)30%-70%, 而无水试管接种成品率几乎为100%. 

同感！

海洋科技

在接种后发现试管中有细菌，不论大家是持什么态度与观点，大家自己做个试验吧！（就明白细菌是从哪里来的的）

试验：分别用有冷凝水的斜面接菌10支，打开试管棉塞接种针进入试管做接种操作（并不接入菌种，接种针在斜面上一划离开，塞好棉塞，连续做10支试管；同样的方法打开棉塞接种针进入试管不在斜面上划线，然后离开塞上棉塞，同样的方法做10支；再做10支只开棉塞不进入接种针的，与普通的接种速度一样，然后塞上棉塞，放到28度温度下培养。

大家就明白细菌是怎么来的了。

江华

QUOTE:

以下是引用香菇人在2010-3-4 19:54:01的发言：
斜面有冷凝水与污染没有直接关系.间接关系是湿棉塞.斜面有冷凝水会使不少食药用菌.菌丝断裂产生游离菌落如猴头菌.金针菇.虫草.灵芝.草菇.木耳.香菇等等.

香菇人老师你好：麻烦一下那冷凝水如何解决，能否赐教。先谢了！

云南菇1

试管种的细菌污染真的很害怕，我也有感染的尽量，不知道要怎么防止！有没有什么抑菌剂可以添加到培养基里？

人生如梦也

QUOTE:

以下是引用南湖春在2010-4-25 21:22:35的发言：

      斜面表面有冷凝水存在时，常常表现出细菌污染，这是不争的事实，有兴趣的话大家可以试验一下。有可能是细菌好水性强，原来的菌种本身就含有细菌，只是在无冷凝水的培养基上没有表现出来，而在无冷凝水的培养基上未表现出来。但肯定和无菌操作无关，同样的操作就表现出来这种差异。
      干燥的棉塞在灭菌时是否达到无菌的程度，没人做过实验，按灭菌原理应该是没有完全灭菌，但如此就将棉塞一棍子打死我觉得并不可取。比较价格昂贵的硅胶塞，棉塞价格低廉，只要操作的得当，是很好的封口材料。硅胶塞透气性差，如果不注意，冷凝水会更多，我用了几次就不再买硅胶塞了。
      棉塞做封口材料，按照下述方法来做，可减少冷凝水，也会降低棉塞污染的风险：
      1.灭菌结束后，自然降温至压力回复到零；
      2.打开锅盖，错开锅盖留10几厘米一条缝，利用锅体余热烘干棉塞；
      3.培养及温度降至60来度取出摆放斜面，斜面长度小于试管总长的2/3，覆盖棉布保温冷却；
      4.可能还会有少量冷凝水，在干燥处放置几天，冷凝水消失后再使用。

这么说没冷凝水接的斜面不是没有细菌，而是没条件萌发，这样岂不是更可怕！

人生如梦也

看完大家的讨论，我倒是有个想法。接母种试管还必须得用带有冷凝水的啊！这样才能辨别出母种上是否带有细菌。哪怕只有一只成功了，那么这一支就是无菌母钟了，再用这一支或一批分接，不管有无冷凝水就不会污染了吧。进一步说，如再出现污染，那就是操作与灭菌的问题了。如果用不带冷凝水的斜面直接来接种，母钟带不带细菌就不好说了。

菌中君

好帖，看是简单的问题，却给我们打开了母种的大门。。。。各位老师辛苦了。。

佳明

真是有人明白有人糊涂。明白人7    －8个。