有关菌种提纯的问题

赵正勇

看来我还得去找点这方面的资料.

luzhln

一般种菇户主要是选好栽培品种，暂时还用不着去分离脱毒。不过今后觉得好品种退化了，又很想用的话，就只有这样了，在试管培养基上进行，记住在普通的PDA培养基上一定要加蛋白胨0.2%，这样既可以脱毒，还可以使菌丝长得很壮的，高产更有把握 了。

仙人掌

是啊，要到有电镜的地方才能检验，对单个的栽培户来说，没什么必要。这主要是科研、推广部门的事，用户只要等好种子就是了。

赵正勇

这个问题以后在请教各位老大吧。谢谢！！！

zxy_641

答luzhln先生：
      孢子分离的菌种，直接使用风险很大，多数情况下可能不出菇，偶尔运气好，可能获得较的产量，但经过几次继代（转管）后，种性有很大变异，原因是多方面的：
      有孢子直接萌发出来的菌丝为单核菌丝，也就是说菌丝体的每一个细胞内只有一个细胞核，这样的菌丝是没有出菇能力的。
      单核菌丝好比孤男寡女，只有不同性别的单核菌丝相互结合成双核菌丝（也就是说每个菌丝细胞中含有两个不同来源的细胞核）后才具备出菇的能力，由于每个细胞核中所携带的遗传基因不同，所以来源于不同组合的双核菌丝在性状表现上会有很大的差异。
      孢子分离技术是食用菌传统的遗传育种手段之一，大多采用单到分离技术得到很多个纯种的单核菌丝，然后再通过不同的杂交组合，筛选出产量高，抗逆性强的、稳定性好的作为菌种推广使用，这是一项很烦琐、很耗时的工作，且要求有相当深厚的微生物遗传学功底。
      孢子分离的第一步是采集无菌孢子，然后可采取单孢分离或多孢分离技术，从你的叙述上看，肯定是后者，你所得到的菌丝不是纯种菌丝，是一个包含不同性状的混合菌丝体，而且有杂菌感染的情况，你可以试验以下方法来分离掉杂菌：
      1。在琼脂鞋面培养基的表面上加一点庆大霉素，等培养基表面干燥后接入你所得到的菌种，培养3~5天后，去菌丝尖端接入普通琼脂斜面培养基中，在进行培养。这样可分离掉细菌污染。
      2。如果有酵母菌污染的话，可用纯锯末调好水分，高压蒸汽灭菌后，接入你的菌种，进行培养7~10天，然后从距离远接种点比较远的地方挑取菌丝，接入新的斜面培养基中。
      不知上述方法是否对你有所帮助，有其他问题只管问。

luzhln

说的好，特别是酵母菌污染后的处理。

仙人掌

单孢分离在生产中还是不可取的，（双孢菇、草菇除外），变异大，出菇试验太烦琐、很耗时，远不如组织分离。不过在具体生产中，多孢分离还是能用的，稳定性也很好。做过多次试验，从没出过能看的出来的变异。

蘑菇人

现在有很多都在搞子实体分离，经过几次提纯和处理，效果好象也还不错，有时很落后的方法其实很起作用。

仙人掌

是的，组织分离是现阶段最常用和最主要的菌种获得方法。基本上是所有单位都在用。

luzhln

单孢分离太繁琐，好品种率低。具说是万分之一，难啊！组织分离简单实用，至少还可以保持原来的形状，若善于观察的话，在种菇棚中，十万朵子实体中，就可以发现一朵变异株，很可能是一个好品种。